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hs-GAL4/UAS-lacZのハエで、一様なX-gal染色ができない
Date: Wed, 21 Jun 1995 21:28:18 +0900
From: tanrcbアットマークmbox.nc.kyushu-u.ac.jp (Teiichi Tanimura)
Subject: [Jfly] hs-GAL4/UAS-lacZ
ネットのみなさんへ
どなたか、hs-GAL4/UAS-lacZのハエのX-gal染色を試みられた方はいませんか？私は
、３系統のhs-GAL4を用いて３令幼虫でやってみたのですが、発現はubiqutousではな
く、唾液腺が強く染まりCNS, discsはほとんど染まらないといってよいほどです。何
か情報を提供していただける方がいらしたらよろしくお願いします。
谷村禎一
P.S.
mailing listを開設していただいた いとけいさんに感謝します。
九州大学 理学部生物学教室 細胞機能学講座 谷 村 禎 一
810 福岡市中央区六本松4-2-1
電話092-771-4161 内線433 FAX 092-712-1587
tanimuraアットマークrc.kyushu-u.ac.jp
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Date: Wed, 21 Jun 1995 22:43:31 +0500
From: ryuアットマークlibra.ls.m-kagaku.co.jp (Ryu Ueda)
Subject: [Jfly] hs-GAL4/UAS-lacZ
ネットの皆さん，こんばんわ。啓さん，大人のおもちゃを有り難うございます。
ところで禎さんのご質問ですが，
>どなたか、hs-GAL4/UAS-lacZのハエのX-gal染色を試みられた方はいませんか？私は
>、３系統のhs-GAL4を用いて３令幼虫でやってみたのですが、発現はubiqutousではな
>く、唾液腺が強く染まりCNS, discsはほとんど染まらないといってよいほどです。何
>か情報を提供していただける方がいらしたらよろしくお願いします。
>谷村禎一
北大の中村さんが，hs-GAL4を用いた系を動かしているはずです。レポーター（？）
はlacZではありませんが。もしかするとUAS-Xの発現についての情報をお持ちかと思
います。
龍
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上田龍
〒194 町田市 南大谷１１
三菱化学生命科学研究所
先端研究部門 神経発生遺伝学研究グループ
e-mail: ryuアットマークlibra.ls.m-kagaku.co.jp
fax: 0427-24-6314
tel: 0427-24-6234
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Date: Thu, 22 Jun 1995 09:21:14 +0900
From: itokeiアットマークfly.erato.jrdc.go.jp (ITO, Kei)
Subject: [Jfly] hs-GAL4/UAS-lacZ
>ネットのみなさんへ
>どなたか、hs-GAL4/UAS-lacZのハエのX-gal染色を試みられた方はいませんか？私は
>、３系統のhs-GAL4を用いて３令幼虫でやってみたのですが、発現はubiqutousではな
>く、唾液腺が強く染まりCNS, discsはほとんど染まらないといってよいほどです。何
>か情報を提供していただける方がいらしたらよろしくお願いします。
>谷村禎一
唾腺が強く染まるのは既存のベクターを使った GAL4 システムに固有の artifact で、
heat shock でなくても出るはずです。ヒートショックは充分かかっていますか？
それから、GAL4 を ubiquitus に出すと細胞毒性のためうまく行かないという噂
を聞いたことがあります。すくなくとも発現の unbiquitus な GAL4 系統はなか
なか取れません。
伊藤
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Date: Thu, 22 Jun 1995 09:54:43 +0900
From: tanrcbアットマークmbox.nc.kyushu-u.ac.jp (Teiichi Tanimura)
Subject: [Jfly] hs-GAL4/UAS-lacZ
At 9:21 AM 95.6.22 +0900, ITO, Kei wrote:
>>ネットのみなさんへ
>>どなたか、hs-GAL4/UAS-lacZのハエのX-gal染色を試みられた方はいませんか？私は
>>３系統のhs-GAL4を用いて３令幼虫でやってみたのですが、発現はubiquitousではな
>>く、唾液腺が強く染まりCNS, discsはほとんど染まらないといってよいほどです。何
>>か情報を提供していただける方がいらしたらよろしくお願いします。
>>谷村禎一
>
>唾腺が強く染まるのは既存のベクターを使った GAL4 システムに固有の artifact で、
>heat shock でなくても出るはずです。ヒートショックは充分かかっていますか？
>それから、GAL4 を ubiquitous に出すと細胞毒性のためうまく行かないという噂
>を聞いたことがあります。すくなくとも発現の unbiquitous な GAL4 系統はなか
>なか取れません。
>伊藤
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伊藤さん
お返事ありがとうございました。ＨＳ無しでも、ＨＳありでもパターンにそれほど
差はありません。強さはＨＳありのほうが少し強くなっています。少々のＨＳではだ
めだったので、ＨＳ37℃１時間でＨＳ後２時間ほどでも染色しました。私は、Jan, P
errimon研の系統でやったのですが、このほかの系統を持っている人はいませんか？
GAL4 システムに固有の artifactは、他のステージではどのような結果なのでしょ
うか？教えてください。
龍さん
中村 真さんからはこの件についての情報は得られませんでした。
谷村禎一
九州大学理学部生物学教室 細胞機能学講座 谷村 禎一
810 福岡市中央区六本松4-2-1
092-771-4161 内433 FAX 092-712-1587
tanrcbアットマークmbox.nc.kyushu-u.ac.jp / tanimuraアットマークrc.kyushu-u.ac.jp