Propidium Iodide (PI) の染め方

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Propidium Iodide (PI) の染め方

Date: Thu, 1 Aug 1996 12:32:10 +0000
From: ku1アットマークmrc-lmb.cam.ac.uk (Kazuya USUI)
Subject: [Jfly] Propidium Iodide

Jflyの皆様、はじめまして。MRCでpost-docをしている碓井と申します。

Confocal microscopy下で蛍光標識したDNAを観察するために、Propidium Iodide (PI
)を使おうと考えています。どなたか、Propidium Iodideのstock solutionの作り方
および使い方をご存じでしたら、お教えください。

碓井　和也
Kazuya USUI
Laboratory of Molecular Biology
Medical Research Council
Hills Road, Cambridge, CB2 2QH
England
E-mail:　ku1アットマークmrc-lmb.cam.ac.uk
Tel:+44 1223 402282
Fax:+44 1223 412142

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Date: Fri, 2 Aug 1996 13:57:21 +0900
From: shayashiアットマークlab.nig.ac.jp (Shigeo Hayashi)
Subject: [Jfly] Propidium Iodide

碓井　和也様
わたしのメモからの記述です。
propidium iodide
プロピジウム　アイオダイドＦＷ668.4 Sigma P-4170 (4C 保存）
ストック溶液は～１０ｍｇ／ｍｌをEtOHに溶かす。

１μg/ml　をＴＢＳＴＥ(TBS+0.2% BSA .1% Tween20, 1mM EDTA: PBT でも同じだと
思いますが)に薄めてembryoに使用。green　filter(FITC用）で観察。
５μg/ml　の時はbluefilterにかぶる。
胚の場合RNase処理は核の染色が消えて細胞質が強くなるので不可。

PIは不安定。どれだけ持つかは不明。古いものはバックが高くなる傾向があった。

5.17.95
larval filletを染色。4%pfa/PBSで固定してＴＢＳＴＥで洗った試料を, １μg/ml P
I, １μg/ml DAPI, 10μg/ml　RNaseA をＴＢＳＴＥ希釈したもので３０分ほど処理
すると良好な核のシグナルが得られる。RNase処理無しだと細胞質のシグナルが強す
ぎてダメであった。

お役に立つと良いですが。

林茂生
国立遺伝学研究所
遺伝実験生物保存研究センター
無脊椎動物保存研究室
〒411三島市谷田1111
電話 0559-81-6823
ファックス 0559-81-6825
電子メール shayashiアットマークlab.nig.ac.jp

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Date: Fri, 2 Aug 1996 10:19:58 +0000
From: ku1アットマークmrc-lmb.cam.ac.uk (Kazuya USUI)
Subject: [Jfly] Propidium Iodide

林　茂生様

PIについての貴重な情報を有難うございました。私は、confocalを使い始めて、間も
ないので、これからも、いろいろとご指導をお願いします。

碓井　和也
Kazuya USUI
Laboratory of Molecular Biology
Medical Research Council
Hills Road, Cambridge, CB2 2QH
England
E-mail:　ku1アットマークmrc-lmb.cam.ac.uk
Tel:+44 1223 402282
Fax:+44 1223 412142