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BrdU を投与するときの濃度
Subject: [Jfly] BrdU の濃度
Date: Sun, 20 Dec 98 21:21:34 +0900
From: Katsuhiko Tabuchi
阪大岡野研の田渕です。Amersham のCell proliferation kit を使って、BrdU を
larvae に取り込ませようと思っているのですが、kit に付いているBrdU の液体に
、濃度が書かれていません。どなたか使ったことの有る方がおられましたら、この
液体をどれくらいの割合でエサに混ぜればいいか教えていただけないでしょうか。
よろしくお願いします。
田渕克彦
Department of Neuroanatomy
Biomedical Research Center
Osaka University Medical School
2-2 Yamamadaoka, Suita, Osaka
565-0871 Japan
Phone: +81-6-879-3581
Fax: +81-6-879-3589
e-mail: tabuchiアットマークnana.med.osaka-u.ac.jp
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Date: Mon, 21 Dec 1998 09:38:22 +0900
From: Shigeo Hayashi
Subject: [Jfly] BrdU の濃度
林です、
At 9:21 PM +0900 12/20/98, Katsuhiko Tabuchi wrote:
> 阪大岡野研の田渕です。Amersham のCell proliferation kit を使って、BrdU を
> larvae に取り込ませようと思っているのですが、
培養細胞ならμg/ml、エサからならmg/mlのオーダーが必要です。幼虫はかなりsick
になります。injectionで入れる人もいるようですね。
> larvae に取り込ませようと思っているのですが、kit に付いているBrdU の液体に
> 、濃度が書かれていません。
このようなこと（濃度、組成）はAmershamに聞くべきですね。
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Date: Mon, 21 Dec 1998 18:22:11 +0900
From: "ITO, Kei"
Subject: [Jfly] BrdU の濃度
> 阪大岡野研の田渕です。Amersham のCell proliferation kit を使って、BrdU を
> larvae に取り込ませようと思っているのですが、
Ito, K., and Hotta, Y. (1992). Proliferation pattern of postembryonic
neuroblasts in the brain of Drosophila melanogaster.
Developmental Biology 149,134-148.
に濃度を書いた記憶があります。幼虫細胞の分裂パターンを調べる人なら
大抵、この論文には目を通しているかなぁ、と思っているのですが。。。
今はどうか知りませんが、この論文を書いた頃は Amersham のキットの
BrdU は 3mg/ml でした。エサに入れる場合は 0.75 mg/ml で使うので、
1/4 に薄めるために、エサと BrdU 溶液を３：１で混ぜて使います。ふつ
うのコーンミールエサを電子レンジでチンして、少し冷えたところに食紅
の粉末と BrdU 溶液を加え、ネチョネチョと混ぜます。食紅がきれいに溶
けて全体が一様に赤くなれば、 BrdU 溶液も一様に溶けた、という仕組み
です。一般に、なにかの薬品を幼虫に食わせるときは、個体によってハン
ガーストライキをする奴も居るので、ちゃんと食べたかどうかをチェック
する必要がありますが、エサに食紅が入っていれば、食べた個体は食道〜
腸が赤くなるので、すぐに分かります。
> 培養細胞ならμg/ml、エサからならmg/mlのオーダーが必要です。幼虫はかなりsick
> になります。injectionで入れる人もいるようですね。
幼虫に injection で入れたことはありませんが、蛹では餌を食べてくれな
いので、injection で入れます。この場合は 3mg/ml の原液を注入
します。
やりかたは Jfly ホームページの下の方にある、
・HTML 化マニュアル類
・蛹のステージングとBrdU微小注入（英語）
を見て下さい。
> > larvae に取り込ませようと思っているのですが、kit に付いているBrdU の液体に
> > 、濃度が書かれていません。
現在のキットの濃度は、林さんのおっしゃるとおりメーカーに確認するべ
きでしょう。ただその前に、取扱説明書をもう一度隅から隅までチェック
した方がいいかも知れません。
いとう
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Subject: [Jfly] BrdU の濃度
Date: Tue, 22 Dec 98 16:34:00 +0900
From: Katsuhiko Tabuchi
阪大岡野研の田渕です。いろいろ御意見有り難うございました。参考にさせてい
ただきます。
Amersham にCell proliferation kit のBrdU の濃度を問い合わせたところ、
BrdU 10mM、FdU 1mM とのことで、BrdU の分子量から換算して約3 mg/ml のようで
した。
田渕克彦
Department of Neuroanatomy
Biomedical Research Center
Osaka University Medical School
2-2 Yamamadaoka, Suita, Osaka
565-0871 Japan
Phone: +81-6-879-3581
Fax: +81-6-879-3589
e-mail: tabuchiアットマークnana.med.osaka-u.ac.jp