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OocyteでのlacZ 染色のノウハウ？
Date: Mon, 28 Dec 1998 21:33:04 +0900 (JST)
From: Shinji Yamaguchi
Subject: [Jfly] oocyte での lacZ stain
こんにちは。
東京大学薬学部発生細胞化学教室の山口と申します。
初めまして。
oocyteでのlacZ stain をしようと思っています。サンプル処理の
ところでembryoと比べて何か異なった処理をするのでしょうか？
知っている方はお教え下さい。
よろしくお願いします。
山口真二
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Date: Mon, 28 Dec 1998 10:57:17 -0600
From: yuzonikiアットマークmidway.uchicago.edu (Yuzo Niki)
Subject: [Jfly] oocyte での lacZ stain
山口様。
Dr. Spradling研のS. Margolisによる方法は以下の通りです。
特別な処理は必要ではありませんが、germalium内のcellsを
染めたいときは、タングステンの針などで、組織をバラバラにした方がいいと思います。
X-gal staining of ovaries, after S. Margolis
1. Remove tissues in PBS
2. Transfer tissues to 0.5% glutaraldehyde in PBS
3. fixed 8-10 min on shaker
4. Remove fixative and wash 3 times with PBT (0.1% Triton-X in PBS)
every 10-15 min
5. Transfer to fresh staining solution
6. Stain at 37C overnight.
7. Dehydrate
70, 90, 100 each 10min
8. Mount with Permount
Yuzo Niki
Dept. Molec. Genet. & Cell Biol.
University of Chicago
920 E. 58th.
Chicago IL 60637
e-mail: yuzonikiアットマークmidway.uchicago.edu