 | Jfly ディスカッション |
Discussion Menu | Jfly Japanese Home Page | Jfly English Home Page
蛍光抗体の対染色としての核染色
Date: Sat, 17 Apr 1999 14:51:11 +0900
From: Yoshiki Takamatsu
Subject: [Jfly] 蛍光抗体の対染色としての核染色
東京都神経研の高松です。お世話になっております。
成虫脳をホールマウントで蛍光抗体染色後、Propidium Iodide (PI) で核の対染色を
試みたいのですがPIでの核染色の方法についてご経験のある方、プロトコルをご存
知の方がいらっしゃいましたらお知らせいただけますでしょうか。蛍光抗体の対染
色に使える核染色であればPIに限らず他の染色液の方法でもかまいません。
よろしくお願いいたします。
高松芳樹
〒１８３−８５２６
東京都府中市武蔵台２−６
東京都神経科学総合研究所
神経細胞生物学研究部門
電話 （０４２）３２５−３８８１
内線４５２１，４５０３
FAX （０４２）３２１−８６７８
＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝
Date: Sat, 17 Apr 1999 15:55:54 +0900
From: Shigeo Hayashi
Subject: [Jfly] 蛍光抗体の対染色としての核染色
林です
以下のメモを参考にしてください。
5.17.95
larval filletを染色。4%pfa/PBSで固定してEWで洗った試料を, １μg/ml PI, １μg
/ml DAPI, 10μg/ml RNaseA をＴＢＳＴＥ希釈したもので３０分ほど処理すると良
好な核のシグナルが得られる。RNase処理無しだと細胞質のシグナルが強すぎてダメ
であった。
ストック溶液は〜１０ｍｇ／ｍｌをEtOHに溶かす。
ＴＢＳＴＥ=10mM Tris Ph 7.5, 150mM NaCl, 2% BSA, 0.1% Triton X100, 1mM EDTA
これはPBS+Tritonでもokだと思う。
＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝
Date: Sat, 17 Apr 1999 18:48:13 +0900
From: Yoshiki Takamatsu
Subject: [Jfly] [Jfly] 蛍光抗体の対染色としての核染色
林先生、お返事ありがとうございます。教えていただいたメモと、また、
Development 118, 105-115 も参考にさせていただいてやってみます。
高松芳樹
〒１８３−８５２６
東京都府中市武蔵台２−６
東京都神経科学総合研究所
神経細胞生物学研究部門
電話 （０４２）３２５−３８８１
内線４５２１，４５０３
FAX （０４２）３２１−８６７８