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AmpliTaqGoldって何？
Date: Thu, 23 Nov 2000 21:05:17 +0900
Subject: [Jfly] AmpliTaqGoldってなに？
From: Shuji Hanai
花井よりJflyの皆さんへ
AmpliTaqGoldって何？
というご質問がいくつか有りましたので参考まで。
「ノンスペを減らす為にTqa DNA polを改造したもの」です
Hot start PCRを行うために突然変異を入れたとか。熱が加わると活性が出てきます。
サイクル等の条件は「Taqとは別物」と思ったほうが良いほど違う感じがします。
他社のHot Start用酵素は「抗Taq抗体」を入れて、最初の熱変成で抗体が失活するそ
うです。
Hot Startでノンスペが減るのは次の様な理由です。普通のTaqで普通に反応したら反
応液がpre heat温度に至る僅かな間にTaqが「非特異的にアニールしたプライマー」
から伸長反応をしてしまい、次からのサイクルでもこのPreheat直前の産物プライ
マーと完全に一致する）からも増幅がおきます。
従来はこれを防ぐために、PCR tubeを氷上に置きブロックが熱くなってからセットす
る（Cold Start)や、AmpliWaxなどがありましたが、今ひとつでした。
勿論、Goldも万能ではなく、ノンスペが出ることも有ります。難点もあり、Goldの活
性化には加熱が必要なので、10分のPreHeatと多めのサイクル数が必要です。
なお、Long PCR用では有りません（3'->5' exo活性は無いので誤って取り込んだ塩基
を修復できない）。
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Date: Fri, 24 Nov 2000 10:11:48 +0900 (JST)
From: tsujmrアットマークcc.tuat.ac.jp (Hidenobu Tsujimura)
Subject: [Jfly] AmpliTaqGoldってなに？
花井様
重ねて質問ですが、メーカーはどこでしょうか。
辻村秀信
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Date: Fri, 24 Nov 2000 12:34:25 +0900
Subject: [Jfly] AmpliTaqGoldってなに？
From: Shuji Hanai
花井より返信。
今は、PEグループのAppliedBiosystemsです。（合併が激しくて、、、）
出入りの業者に頼めば型録をくれると思います。（上手くすれば、サンプルも）
他社でも
LifeTech(BRL)でプラチナTaq（複数の抗Taq抗体）
Toyoboも（抗Taq mAb)
など後発で出しているので、これらはサンプルなど手に入れやすいと思います。
うちではGold以外は試していませんが、抗体なら反応条件は普通Taqと同じで良いは
ずですから扱いやすいかも知れません。