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液体窒素で凍結したハエ頭部と胴体の分離法


Date: Wed, 25 Apr 2001 15:49:40 +0900
From: "ITO, Kei"
Subject: [Jfly] 液体窒素での頭部の分離

入会希望と一緒について来た質問のメールを転送します:いとうκ

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初めまして、私、新潟大学脳研究所の博士過程3年の本多 敦子と申します。

現在、ショウジョウバエの脳蛋白質の大量精製を試みているのですが、
文献等を参考に、液体窒素で凍結したショウジョウバエの頭部を、振るい
で胴体部と分けようとしたのですが、せっかく胴体と離れた頭部が(静電
気のせいか?)金属メッシュに吸着してしまい、回収できずに困っており
ます。メッシュを何かでコートした方がいいのでしょうか?
もし、頭部の大量収集のよい方法を御存知でしたら教えて頂きたいのです
が、よろしくお願い致します。

新潟大学脳研究所 細胞神経生物学分野
博士過程3年 本多 敦子


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From: Kohei Ueno
Date: Wed, 25 Apr 2001 16:24:55 +0900
Subject: [Jfly] 液体窒素での頭部の分離

群馬大学の上野耕平です。


私も学生時代に良く上記の方法で頭部と胴体の分離をやっておりました。
このメッシュに吸着してしまうのは急速にメッシュが低温になるため、
メッシュが結露し、さらにその水が再凍結してしまうためだと思います。

これを回避するために、まずメッシュをよく乾燥させ余分な水分を除く
こと、使用直前まで液体窒素でメッシュも冷やしておくこと、さらに分離
された頭は直ちにメッシュから回収するなどすると良いのではないかと
思います。

既に試されておられる方法でしたら申し訳ありません。

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Kohei Ueno
Institute for Behavior Sciences
Gunma University School of Medicine
3-39-22 Showa-machi Maebashi
371-8511 Japan
+81-27-220-8044
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From: saitoeアットマークtmin.ac.jp
Date: Wed, 25 Apr 2001 16:27:32 +0900
Subject: [Jfly] 液体窒素での頭部の分離

メッシュの冷えが足りないのでわ?
メッシュの温度が分離した頭部より高いと結露してへばりつきます。
ドライアイスや液体窒素で冷やしてみてわ?

齊藤 実

東京都神経科学総合研究所
分子神経生理部門


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Date: Thu, 26 Apr 2001 11:16:16 +0900
From: Tanaka Yoshiharu
Subject: [Jfly] 液体窒素での頭部の分離

もうほとんど解決策が出されていますが、最近、頭部mRNAの精製をやったところなの
で、補足させていただきます。
メッシュばかりでなく、破砕用チューブや頭部回収用容器など、使う器具類は出来
る限り液体窒素で充分冷やしておく方がよいです。
詳しい手順が必要でしたら送ります。


田中 良晴
大阪府立大学総合科学部自然環境科学科
〒599-8531 大阪府堺市学園町1-1
Email: yoshitanアットマークel.cias.osakafu-u.ac.jp
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