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ハエを飢餓処理する方法
Date: Mon, 16 Jul 2001 10:52:17 +0900
Subject: [Jfly] 飢餓処理の方法
From: 由比良子
Jflyの皆様初めまして、私お茶の水女子大学Ｍ２の
由比良子と申します。
現在、薬剤をスクロース水溶液に混ぜてハエに食べさせようと
しているのですが、より効率的に食べてもらうために
飢餓処理をしようと考えています。
しかし論文等には「starved for ○h」と書いてある
だけで、詳しい方法が分かりません。空のバイアルに
入れれば良いのでしょうか？
方法を御存じの方にぜひ教えていただきたいと思い
質問させていただきました。
よろしくお願いいたします。
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由比 良子 (Ryoko Yui)
お茶の水女子大学大学院
松浦研究室 Ｍ２
g0040463アットマークedu.cc.ocha.ac.jp
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Subject: [Jfly] 飢餓処理の方法
Date: Mon, 16 Jul 01 13:46:31 +0900
From: 館野実
由比さま
名大理・館野と申します。
以前EMSをハエに食べさせた時、「飢餓処理」しました。
具体的にはおっしゃる通り、空のバイアルに成虫を入れて放置しました。私がやっ
たときは３時間脱水しました（もっと長い時間脱水させるよう、本には書いてあっ
たと記憶していますが）。
ご参考になればと思います。
たての
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館野 実
〒464-8602 名古屋市千種区不老町
名古屋大学大学院 理学研究科 生命理学専攻
TEL : 052-789-2508 FAX : 052-789-2511
E-mail : mtatenoアットマークbio.nagoya-u.ac.jp
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Date: Tue, 17 Jul 2001 00:05:44 +0900
From: Teiichi Tanimura
Subject: [Jfly] 飢餓処理の方法
> 現在、薬剤をスクロース水溶液に混ぜてハエに食べさせようと
> しているのですが、より効率的に食べてもらうために
> 飢餓処理をしようと考えています。
私たちは味覚の行動テストために（絶水はしなく）絶食するのに以下の方法
を用いています。
バイアルの底に短冊状に切ったキムワイプをいれ、最低量の水を入れて押し
固める。
新しい培地に数時間以上いたハエを入れて20時間おく。
この条件であれば、例えば、0.1 M sucroseを与えればハエは１時間以内に
満腹になります（糖溶液の与え方にもよります）。
薬剤を投与するのが目的であれば、薬物が、何らかの摂食阻害効果を示すこ
とに注意が必要でしょう。
対策
-糖濃度を上げる。
-糖溶液に食用色素を混ぜておいて腹部の着色で摂食を確認する（これは個
体間の摂食量の違いを確認するにも役立ちます）。
一時的に投与するのが目的であれば絶食するのがよいですが、そうでない場
合は、培地に混ぜることもできます。
以上、参考になれば幸いです。
谷村 禎一
九州大学大学院 理学研究院 生物
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From: tanakaアットマークbio.phys.s.u-tokyo.ac.jp
Date: Tue, 17 Jul 2001 12:22:38 +0900
Subject: [Jfly] 飢餓処理の方法
谷村先生へ。
初めまして、東大理D1の田中宏昌と申します。
私も0.1Msucroseを使ってEMSをハエに投与する突然変異誘発実験を最近始めたところ
です。
そこで、以下の内容について質問があります。
> バイアルの底に短冊状に切ったキムワイプをいれ、最低量の水を入れて押し
> 固める。
> 新しい培地に数時間以上いたハエを入れて20時間おく。
> この条件であれば、例えば、0.1 M sucroseを与えればハエは１時間以内に
> 満腹になります（糖溶液の与え方にもよります）。
絶水と比べて、こちらの方が効率よく飲ませられますか？
> -糖溶液に食用色素を混ぜておいて腹部の着色で摂食を確認する（これは個
> 体間の摂食量の違いを確認するにも役立ちます）。
どのような色素を実際に用いましたか？
コメントを読んでいて、色素を混ぜて腹部の着色で摂食を確認したいと思いました。
お手数ですが、ご返答よろしくお願いします。
東京大学理学系研究科物理学専攻能瀬研
田中宏昌
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Date: Tue, 17 Jul 2001 15:15:31 +0900
From: Teiichi Tanimura
Subject: [Jfly] 飢餓(EMS)処理の方法
ご質問にお答えします。
> 絶水と比べて、こちらの方が効率よく飲ませられますか？
絶食+絶水はかなりハエにとってシビアですね。
絶食+絶水は12時間までに留めたほうがよいでしょう。
室内の湿度やハエの系統によって絶水の状態は異なってきます。
水は与えるという条件は、少しだけハエにとって優しいと思います。
EMS処理の場合は、適度のdoseがありますので、基本的にLewis and Bacher(1968)の定法
に従うのが良いと思います。sucroseは1％ですから、87.6 mMです（100 mMとあまり変わ
りませんが）。
絶食+絶水を12時間行った場合の致死率の変化は、Ashburnerのハンドブックの348ページ
に書いてあります。
何らかの理由でdose上げたい場合には、EMSは摂食阻害効果があるためEMSの濃度を上げ
ても摂食量が比例するわけではない（前掲347ページ）ことも考慮に入れる必要がありま
す。
また、EMSは水溶中で分解しますので、12時間後には濃度はたしか半分ほど？になってい
るはずです。
要約すると、EMSの摂取量は、ハエの空腹状態、EMS濃度、糖濃度に依存しており、空腹
状態、EMS濃度は時間とともに変化します。
そこで、食用色素によるマーキングが有用です。
用いる食用色素は「食用青色１号」（東京化成F147）で、2.5〜1.25 mg/mlの濃度で使用
します。ショウジョウバエに対する安全性は確かめられています。
追加（老婆心から）
EMSの取り扱いにはくれぐれも注意すること。
EMSは水に溶解しにくいのでよく混和すること。
分解液0.5% mercaptoacetic acid in 1 M NaOHを用いて分解処理を行うこと。
谷村 禎一
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From: tanakaアットマークbio.phys.s.u-tokyo.ac.jp
Date: Tue, 17 Jul 2001 17:09:24 +0900
Subject: [Jfly] 飢餓(EMS)処理の方法
谷村先生へ。
迅速で親切なご返答ありがとうございました。
安全第一で実験を進めたいと思います。
東京大学理学系研究科物理学専攻能瀬研
田中宏昌
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Date: Wed, 18 Jul 2001 15:38:16 +0900
Subject: [Jfly] 飢餓処理の方法
From: 由比良子
お茶の水女子大の由比良子です。
たくさんのご助言を頂き、ありがとうございました。
大変参考になりました。
今後ともどうぞよろしくお願い致します。
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由比 良子 (Ryoko Yui)
お茶の水女子大学大学院
松浦研究室 Ｍ２
g0040463アットマークedu.cc.ocha.ac.jp