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GFP バランサーの使い勝手


Date: Tue, 11 Sep 2001 08:26:19 +0900
Subject: [Jfly] GFP バランサーもう一度
From: Tadashi Uemura

皆さま

京都大の上村です。以前も話題になった GFP バランサーについて、もう一度質問さ
せて下さい。

Q1.ストックセンターの #5195 (TM3 p[Kr-GAK4] p[UAS-GFP]) の蛍光パターンを
観察された方はおられますか。特に、胚の孵化直前から1齢幼虫にかけてどのような
パターンで光るか、知りたいのです。系統は取り寄せましたが、観察に回すまで増や
すのは当分無理のようなので、すでに観察されておられる方にお尋ねしたくなりまし
た。

Q2.上記の質問と関連して。胚の孵化直前から1齢幼虫にかけて、特徴的なパター
ンで蛍光を発してくれる第3のバランサーを探してます(注文が多いですね)。「特
徴的なパターンで」とただし書きをつけたのは、バランサー上の GFP とは別に、特
定の細胞を標識する GFP マーカーを組み合わせて使いたいためです。「特定の細胞
を標識する GFP マーカー」が、見たい細胞に本当に特異的なら問題はないのですが、
どうしても他の組織も光ってしまいます。そのために、バランサー上の GFP 由来の
パターンと区別が困難になります。バランサー上の GFP が、ストライプのように規
則性のあるパターンでスカッと光ってくれるなら、嬉しいのですが。

以前、en-nls-GFP を持ったバランサーの作製を報告された月田プロジェクトの秋山
さんにお伺いしたのですが、クチクラができ始めると自家蛍光のために判別が困難に
なると教えて頂きました。また、先月の研究集会で RFP バランサーのポスターを出
しておられた、林研の秋元さんから株を分けて頂き、観察させてもらおうとしている
ところです。

ご存じの方、よろしくお願いします。

上村

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上村 匡

〒606−8507
京都市左京区聖護院川原町53
京都大学ウイルス研究所
遺伝子動態調節研究部門 
分子遺伝学研究分野

(電話)   075-751-4031
(ファックス)075-751-3989
(メール)tuemuraアットマークvirus.kyoto-u.ac.jp
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Date: Mon, 10 Sep 2001 18:15:13 -0700
From: Makoto Sato
Subject: [Jfly] Re: GFP バランサーもう一度

上村先生、

ご存じかも知れませんが、Mechanisms of Development 91 (2000) 451-454
に各ステージの写真が出ていますよ。
embryoの孵化直前(st16~17)から一齢幼虫にかけてならば、
larval eyeでの発現がものすごく明るく、特徴的です。
むしろ、このくらいのステージが最も見分けやすいと思います。
眼以外はあまりよく見ていないのでよくわかりませんが。

>Q1.ストックセンターの #5195 (TM3 p[Kr-GAK4] p[UAS-GFP]) の蛍光パターンを
>観察された方はおられますか。特に、胚の孵化直前から1齢幼虫にかけてどのような
>パターンで光るか、知りたいのです。系統は取り寄せましたが、観察に回すまで増や
>すのは当分無理のようなので、すでに観察されておられる方にお尋ねしたくなりまし
>た。
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Makoto Sato (Kornberg lab)
University of California, San Francisco,
Dept. of Biochemistry, Box0448
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Fax: 415-476-3892
E-mail: makotosアットマークitsa.ucsf.edu
satoumaアットマークpo.jah.ne.jp
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Date: Tue, 11 Sep 2001 10:27:00 +0900
From: Ryutaro Murakami
Subject: [Jfly] GFP バランサーもう一度

山口大学、村上です。
#4534 TM3 Actin GAL4 は後期胚ー1齢幼虫では、前胃外壁の一部と中腸のCopper
cell-Iron cell の区画あたりが強く光ります。