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normal goat serumの熱処理
Date: Tue, 14 Jan 2003 19:10:18 +0900
From: TSUJIMURA Hidenobu
Subject: [Jfly] normal goat serumについて
農工大学の辻村です。
抗体染色についての質問です。
抗体による組織染色において、blockingのために、normal goat serumを
使いますが、抗体染色法の標準的なプロトコール集には、使用にあたっては、
血清を熱処理（非働化）した後、フィルター（０．２ミクロン）でこして、使用
するように書いてあります。この時の、熱処理の目的は何でしょうか。
一般に、フィルター減菌したnormal goat serumが売られています。そこで
質問ですが、蛍光抗体染色の場合、これをそのまま使用できるのか、やはり、
熱処理が必要なのか教えていただけませんか。また、ＨＲＰ染色の場合は
いかがですか？
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Date: Wed, 15 Jan 2003 09:03:51 +0900
Subject: [Jfly] normal goat serum について
From: Naoto JUNI
早稲田大学 従二です。
非働化、つまり補体を不活性することですが、
細胞培養に添加する血清は、補体系による細胞傷害を防ぐために
必須だと思いますが、抗体染色の時はどうなのでしょう？
抗血清をその道のエキスパートに外注したときに、注意書きとして、
前処理として非働化するのが一般的とありましたが。。。
それまで、その知識が無くて、自前で抗血清を作ったときは
そのまま使っていましたが、それ故に起こった問題に心当たりはありません。
もしかすると、組織標本に対しても補体系が細胞傷害を起こして、
morphologyに悪影響を与えたりするのでしょうか。
はっきりしない話ですみません。